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細胞系的細胞培養(yǎng)步驟,分享給大家
更新時間:2021-01-26 點擊次數(shù):1653次
  細胞系中篩選出來細胞株的有特殊屬性的比如無線增值的。細胞株:通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標志物的培養(yǎng)物稱為細胞株,也就是說,細胞株是用單細胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法,由單細胞增殖形成的細胞群。細胞株的特殊性質(zhì)或標志必須在整個培養(yǎng)期間始終存在。
 
  細胞系是原代細胞經(jīng)傳代成功后即為細胞系。泛指一般可能傳代的細胞。其中能夠連續(xù)傳代的細胞叫做連續(xù)或無限,不能連續(xù)培養(yǎng)的稱為有限細胞系。大多數(shù)二倍體細胞為有限。由原先存在于原代培養(yǎng)物中的細胞世系所組成。如果不能繼續(xù)傳代,或傳代次數(shù)有限,可稱為有限,如可以連續(xù)培養(yǎng),則稱為連續(xù),培養(yǎng)50代以上并無限培養(yǎng)下去。人類zhongliu細胞,在體外培養(yǎng)半年以上,生長穩(wěn)定,并連續(xù)傳代的即可稱為連續(xù)性株或系。
 
  細胞系對于生物醫(yī)學研究是非常有價值的工具。然而,它們作為正常或患病組織模型的有效性有賴于它們真的是研究人員所認為的組織類型和物種。ATCC細胞系作為體外模型而被廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學研究。正確數(shù)據(jù)的獲得常常依賴于細胞系的特性,尤其是當它用來替代其來源者的組織時。
 
  細胞系的細胞培養(yǎng)步驟:
 
  一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
 
  1)準備培養(yǎng)基;北美胎牛血清,10%;雙抗1%。
 
  2)培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
 
  3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
 
  二.細胞系的菌種處理:
 
  1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
 
  2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
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