免疫熒光通過特異性熒光抗體結(jié)合細胞內(nèi)的生物靶標抗原，從而實現(xiàn)對靶標分子在細胞內(nèi)的分布及定位分析。該方法可以對組織塊兒、培養(yǎng)細胞或單個細胞進行標記，用于分析蛋白、糖原、及生物/非生物小分子，與此同時，免疫熒光也可以DAPI、Hochest33342等其他非抗體熒光標記染料聯(lián)合使用。
 

　　免疫熒光是標記免疫技術(shù)發(fā)展zui早的一種，它是在免疫學(xué)、生物化學(xué)和顯微鏡技術(shù)的基礎(chǔ)上建立起來的一項技術(shù)，通過將抗體與一些示蹤物質(zhì)結(jié)合，利用抗原抗體反應(yīng)進行組織或細胞內(nèi)抗原物質(zhì)的定位。步驟包括，細胞固定和通透，封閉，孵育一抗，二抗等。除了這些基本步驟，以下建議可以幫助您獲得更好的實驗結(jié)果。
 

　　用熒光抗體示蹤或檢查相應(yīng)抗原的方法稱熒光抗體法。用已知的熒光抗原標記物示蹤或檢查相應(yīng)抗體的方法稱熒光抗原法。免疫熒光組織化學(xué)分直接法、間接法和補體法。
 

　　某些抗原可以用熒光素標記，制成熒光抗原，標記熒光素的方法與制備熒光抗體方法相同。用熒光抗原可以直接檢查細胞或組織內(nèi)的相應(yīng)抗體，特異性較好，敏感性較差。染色方法同熒光抗體染色的直接法。由于多數(shù)抗原難以提純或量少不昂貴，一般很少采用此法。
 

　　熒光顯微鏡是免疫熒光細胞化學(xué)的基本工具。它是由光源、濾板系統(tǒng)和光學(xué)系統(tǒng)等主要部件組成。是利用一定波長的光激發(fā)標本發(fā)射熒光，通過物鏡和目鏡系統(tǒng)放大以觀察標本的熒光圖像。其被廣泛的運用在生物學(xué)、醫(yī)藥研究領(lǐng)域。